要想胎牛血清的質量不被損壞,學會這幾點是必要的
隨著胎牛血清使用越來越廣泛,胎牛血清組份的復雜性及作用機理的關聯(lián)性,使得人工無血清培養(yǎng)基添加物想要模擬胎牛血清組份的作用就難上加難了.但隨著細胞生物學及發(fā)酵制藥工業(yè)的發(fā)展,成本及潔凈程度的要求下,勢必會有新的人工替代試劑出現(xiàn),而這需要我們科研人員的共同努力.
對于胎牛血清的功能進行詳細分析:
1.提供對維持細胞指數(shù)生長的激素,基礎培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物.
2. 提供結合蛋白,能識別維生素 脂類 金屬和其他激素等,能結合或調變它們所結合的物質活力.
3.有些情況下結合蛋白質能與有毒金屬和熱原質結合,起到解毒作用.
4.是細胞貼壁 鋪展在塑料培養(yǎng)基質上所需因子來源.
如何儲存和解凍胎牛血清才不會使產品質量受損?
1.將血清從冷凍箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室溫下使之全融.但必須注意的是,融解過程中必須規(guī)則地搖晃均勻.
2.長時間儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素 纖維蛋白原 玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁.因此,推薦在-20℃以下儲存血清,并避免反復凍融.
3.我們建議胎牛血清應保存在-2O℃.若存放于4℃時,請勿超過一個月.若一次無法用完一瓶,建議無菌分裝血清至恰當?shù)臏缇萜鲀?再放回冷凍.
胎牛血清保存方法:
(1)長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.
(2)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內一起過濾,切勿直接過濾血清.
(3)血清解凍:瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現(xiàn)沉淀.